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深海科學與工程研究所
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FISH-TAMB,一種無需固定細胞的mRNA 熒光標記技術

文章來源:供稿/供圖:劉翠艷  |  發(fā)布時間:2022-01-18  |  【打印】 【關閉

  近期地外海洋系統(tǒng)研究室劉翠艷研究員作為共同通訊作者在微生物生態(tài)學期刊Microbial Ecology上在線發(fā)表論文一篇,題為 FISH-TAMB, a Fixation-Free mRNA Fluorescent Labeling Technique to Target Transcriptionally Active Members in Microbial Communities。研究人員開發(fā)了一種適用于標記古菌和細菌的信使RNA(mRNA)的熒光原位雜交(FISH)技術。FISH-TAMB 方法與現(xiàn)有 FISH 方法的不同之處在于緩沖液中不含固定劑或表面活性劑,在目標細胞的生長溫度下雜交時間短至 15 分鐘,并且省略了洗滌步驟。論文詳細地介紹了 FISH-TAMB 的制備和應用例子。通過對(1) 表達產甲烷菌 Methanosarcina barkeri mcrA基因的大腸桿菌; (2) M. barkeri;和(3) 來自深部大陸鉆孔的厭氧甲烷營養(yǎng) (ANME) 富集培養(yǎng),證明了FISH-TAMB 標記細胞內 mRNA 靶標、區(qū)分轉錄狀態(tài)、檢測活躍和稀有分類群以及保持細胞活力的能力。FISH-TAMB 具有多復用和可應用于16S rRNA的潛力,在環(huán)境微生物學領域具有潛在的廣泛應用。 

 

    

FISH-TAMB探針構象及與信使RNA雜交過程(Harris, Lau et al. 2021) 

    

  原文鏈接: 

  https://link.springer.com/article/10.1007/s00248-021-01809-5 

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